该文章的题目为“基于CRISPR-Cas12a-多重RPA快速检测技术检测五种碳青霉烯酶的方法的建立与临床应用评价”,其主要内容是碳青霉烯类抗生素作为临床治疗用药的最后一道防线,越来越受到含碳青霉烯酶的多重耐药菌的挑战,这类多重耐药菌的快速传播是导致严重全球健康问题最大威胁。面对该多重耐药菌的快速传播,我们开发了一种以多重RPA扩增技术为核心的CRPSPR-Cas基因编辑快速检测技术。该技术方法可直接从样本中分离出含碳青霉烯酶细菌的基因,且检测所需时间较短仅需30min、检测时所用的仪器较为廉价,仅需一台水浴锅即可完成重组酶聚合酶扩增及反式切割的全过程。该反应全程无需开盖,同时减少了大量气溶胶污染,该方法检测的灵敏度是1x10-7μg/μl,特异性是97.3%,是一种既适用于室外低资源环境下的筛选也适用于室内大规模人群检测的多场景的检测方法,它的检测结果可广泛应用于医院院感防控和为临床诊断治疗提供理论参考。
图2:RPA-CRISPR-Cas快速检测平台的建立
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